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    Abcam抗體:ab72340抗體

    簡要描述:

    Abcam抗體:ab72340抗體
    Abcam公司是世界有名的抗體王國,以優質、齊全的產品、完善的網絡支持功能和強大的隊伍得到客戶的認可和贊譽。并在2004年獲得了對于生物界公司*的英女王獎,擁有很好的度和口碑。

    產品時間:2020-05-06

    訪問量:610

    廠商性質:經銷商

    Abcam抗體:ab72340抗體

    抗體的保存:

    抗體保存與運輸得當與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當,大部分抗體活性都可以維持數月甚至數年。

    收到抗后請務必在12000rpm離心1分鐘后再打開管蓋進行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請延長離心時間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來)!

        Abcam的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在12000rpm離心1分鐘才能將附著在管壁或蓋內的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm離心也會導致離心不*,導致出現抗體的量不足的現象!

       通常情況下,抗體經恰當保存和處理,大多數應能保持活性數月乃至數年。當然,不同類型抗體,其保存的方法也可能不一樣,以下就抗體的保存,提供一些參考!

      Abcam抗體:ab72340抗體

      一、保存溫度和條件

        對于很多抗體而言,保存在-20℃是*足夠了,沒有任何證據顯示保存在-80℃會有更多的好處!分裝成小等份可zui大程度減少由凍融造成的損傷,以及從單個試劑瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需凍融一次,如有剩余,可將剩余物保存于 4oC. 在收到抗體時,在 10,000 × g 下離心 20 秒以沉積截留于試劑瓶螺紋的溶液,并以小等份轉移至低蛋白結合微量離心管中。小等份的量取決于實驗人員在實驗中通常采用的量。小等份應不小于10 µl; 等份越小,儲液濃度因抗體蒸發及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。

        在大多數情況下,收到抗體時在 4oC 下保存一至兩周,然后再冷凍進行長期保存是可接受的,但也許腹水液是例外,它可能包含蛋白酶,因而應該盡快凍存。同樣,遵照說明書上的建議是重要的。

        大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要1-2周的時間,所以是在4℃的條件下來完成的。

        對于特殊的抗體,如酶、熒光素等偶聯抗體、IgG3同型抗體等抗體的保存有其注意事項:

        1、偶聯抗體 酶偶聯抗體不應凍存,而應保存于 4oC. 凍融不僅影響抗體結合能力,還會降低酶活性。無論偶聯至熒光染料、酶還是生物素,偶聯抗體都應保存于深色試劑瓶中或用金屬箔包裹. 暴露于光線中將損害偶聯物的活性。特別是熒光偶聯物易受到光漂白影響,在實驗的所有階段都應避光。

        2、IgG3的同型對照 保存在4℃,避免凍起來。因為如果出現凍融過程,該抗體非常容易形成多聚體

        二、用Die氮化鈉防止污染

        為了防止微生物污染,可將Die氮化鈉加入抗體制備品中達到0.02% (w/v). 的終濃度。但是有時不能使用Die氮化鈉,有以下兩中情形:

        (1)、如果用抗體染色或處理活細胞,或如果用抗體進行體內研究,一定要使用不包含Die氮化鈉的制備品。該抗菌劑也對大多數其它生物具有毒性:它阻斷細胞色素電子傳遞系統。

        (2)、Die氮化鈉會干擾氨基參與的任何偶聯,應在偶聯進行前除去。偶聯后,

        抗體可保存于Die氮化鈉中,除此以外,0.01% 硫汞撒(硫柳汞)不含伯胺,也是可接受的替代物。

        Die氮化鈉可通過透析或凝膠過濾從抗體溶液中除去。IgG 的分子量為 150,000 道爾頓(IgM 為約 600,000);Die氮化鈉的分子量為 65 道爾頓。截留分子量為 14,000 道爾頓的微透析裝置可保留抗體同時使Die氮化物向外擴散。在保持于 4oC 的磁性攪拌器上的燒杯中,每毫升抗體使用至少一升冷 PBS 并攪拌透析裝置 6 小時。更換 PBS 兩次,每次更換攪拌至少 6 小時。如有可能,所有材料都應滅菌并且所得的制備物應無菌操作。

        三、冷凍/融化損傷

        重復冷凍/融化循環可使抗體變性,導致其形成使抗體結合能力降低的聚集物。保存于 -20oC 對于大多數抗體是適當的;保存于 -80oC 無明顯優勢。冰箱不能為無霜型。 這些冷凍和融化之間的循環(以減少結霜)恰恰是應該避免的。出于相同原因,抗體試劑瓶應置于具有zui小溫度波動的冰箱區域,例如朝冰箱后部放置而不是置于門架上。

        有些研究人員加入冷凍保護劑甘油達到 50% 的終濃度以防止冷凍/融化損傷;甘油可將凝固點降低至低于 -20oC。雖然這對于很多抗體是可接受的,但還是不能確保在該保存條件下的穩定性,通常我們參考具體產品說明書提供的保存方法。在這里,我們也一般不建議將包含甘油的溶液保存于 -80oC,因為該溫度低于甘油的凝固點。還要注意甘油可被細菌污染。如果加入甘油或任何冷凍保護劑,則應當小心操作,以得到無菌制備物。

        應避免抗體在稀釋至工作濃度后在 4℃ 下保存超過一天。蛋白質在高濃度下保存時一般不易降解,理想的濃度為 1 mg/ml 或更高。這是在抗體溶液中加入蛋白質例如 BSA 作為穩定劑的理論基礎。加入的蛋白質也有助于減少抗體因結合于容器壁上而造成的損失。對于打算進行偶聯的抗體而言,由于穩定蛋白質會與抗體競爭,降低了偶聯的效率,所以不應加入穩定蛋白質。

       

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